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如何是目标基因的自我环化和反向衔接 (目标基础)

SEO攻略 2024-08-06 16

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如何是目标基因的自我环化和反向衔接
如图，第一个图说“防止轻易衔接”，然而关于图二，假设我用Pst I和EcoR I把图甲切开后，这个
构建基因表白载体的环节中，切割质粒和目标基因时能否须要同一种限度酶？

如何是目标基因的自我环化和反向衔接

双酶切.在基因两端区分用不同的内切酶来酶切,载体上也用这两种酶来酶切.这样自己的酶切位点只能识别自己的位点,就不会出现基因方向的失误了.而且载体的两个位点相互不识别,也不会自衔接.

如图，第一个图说“防止轻易衔接”，然而关于图二，假设我用Pst I和EcoR I把图甲切开后，这个

那个属于目标基因的自身环化，而不是轻易衔接。用两个不同的限度酶切目标基因，可以防止目标基因在连入质粒时反向衔接

构建基因表白载体的环节中，切割质粒和目标基因时能否须要同一种限度酶？

关于这个疑问，采取以下回答：1.教材中确实驳回单酶切的方法（由于咱们的基因工程处于飞速开展的阶段，以前多驳回此方法），假设应答考试，标题没有特意说明即以为用同一种限度性核酸内切酶；2.然而单酶切容易出现反向衔接和自身环化的疑问（可以自己在草稿纸上举例试一试），所以如今的技术多驳回双酶切，即目标基因两端的粘性末端不同，从而防止反向衔接和自身环化，有效提高构成重组DNA的效率。

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